營口市分子診斷試劑原材料研發(fā)
發(fā)布時間:2022-10-09 01:36:12
營口市分子診斷試劑原材料研發(fā)
熱啟動PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時才發(fā)揮作用的PCR,可提高反應的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強的活性。PCR 反應的初加熱過程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結果會導致非靶序列的擴增,影響反應的特異性。熱啟動可減少非靶序列的擴增,提高反應的特異性。在引物設計時如果某位點因為遺傳元件的定位而受限,如site-directed 突變、表達克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構建和操作等情況,熱啟動PCR 尤為有效。

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Taq酶的酶動力與擴增效率有關。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強,PCR擴增的指數增長期越長,‘S型’曲線更加典型,熒光信號值更高,而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶,在國外品牌中,英國Bioline公司的熱啟動Taq酶,酶動力較好,可做4重PCR,等量起始模板CT30時的熒光信號值高。在國內品牌中,BIOG熱啟動Taq酶的指數期較長,可做3重PCR,且擴增曲線的‘S’型不受影響,其它的國產品牌一般只能支持2重反應,在做3重反應時,擴增曲線低矮,熒光信號值較低,無典型擴增曲線,結果很難判定。

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動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病,即由病原體侵入動物體內,使動物產生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病,如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病,即由寄生蟲寄生在動物體內或體表引起 的疾病,如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產和人體健康的危害程度,我國還 將動物疫病分為下列三類:對人畜危害嚴重、需要采取緊急、嚴 厲的強制預防、控制、撲滅措施的為一類疫??;可造成重大經濟 損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施,防止疫情擴散的為二類疫 ??;常見多發(fā)、可能造成重大經濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。

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做好免疫記錄。養(yǎng)殖場(戶)要詳細記錄畜禽存欄、出欄、免疫等情況,特別是疫苗種類、生產廠家、生產批號等信息。鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫機構、村級防疫員要做好免疫記錄、按時報告,確保免疫記錄與畜禽標識相符。落實報告制度。各省份按月報告疫苗采購及免疫情況。在每年3—5月、9—11月春秋兩季集中免疫期間,對免疫進展實行周報告制度。各省份要明確專人負責匯總、統(tǒng)計免疫信息,按時報中國動物疫病預防控制中 心。

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加強技術指導。中國動物疫病預防控制中 心要制定國家動物疫病強制免疫技術指南,組織開展省級免疫技術師資培訓。國家獸醫(yī)參考實驗室、專業(yè)實驗室、區(qū)域實驗室和各省份動物疫病預防控制中 心要持續(xù)跟蹤病原變化和流行趨勢,為各地免疫方案的制定、疫苗的選擇和更新提供技術支撐。各省份要組織做好鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫機構、村級防疫員及社會化服務組織的免疫技術培訓。疫苗及診斷試劑供應企業(yè)要做好培訓、技術服務等工作。