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通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2025-03-16 00:58:44
通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

在動(dòng)物疫病診斷標(biāo)準(zhǔn)等技術(shù)規(guī)范中,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)試驗(yàn)中加底物的反應(yīng)步驟進(jìn)行規(guī)定,規(guī)定固定的時(shí)間,然后加終止液。但是,在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中,加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)情況對(duì)反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)行調(diào)整。如當(dāng)陰性與陽(yáng)性對(duì)照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后,實(shí)驗(yàn)人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時(shí)間可能太長(zhǎng)或者太短,這樣會(huì)對(duì)反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng),樣品則有可能呈現(xiàn)陽(yáng)性,易導(dǎo)致誤診情況的產(chǎn)生。

通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

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化驗(yàn)室診斷方法- -般采用的檢測(cè)依據(jù)為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn),其次是有關(guān)動(dòng)物疫病檢測(cè)的其它技術(shù)規(guī)程、規(guī)范等,還可以采用化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。應(yīng)結(jié)合化驗(yàn)室條件及樣品類(lèi)型等因素來(lái)選擇合適的方法。例如,化驗(yàn)室需診斷偽狂犬病,如果沒(méi)有基因擴(kuò)增儀,但有酶標(biāo)儀,就可以采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷,而不必用聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)診斷。使用化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢驗(yàn)方法要慎重,因?yàn)?,一該檢驗(yàn)方法是否正確有待驗(yàn)證;二如果將來(lái)有爭(zhēng)議.上訴法院,會(huì)有較大的麻煩。

通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

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熱啟動(dòng)PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過(guò)70℃時(shí)才發(fā)揮作用的PCR,可提高反應(yīng)的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強(qiáng)的活性。PCR 反應(yīng)的初加熱過(guò)程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結(jié)合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結(jié)果會(huì)導(dǎo)致非靶序列的擴(kuò)增,影響反應(yīng)的特異性。熱啟動(dòng)可減少非靶序列的擴(kuò)增,提高反應(yīng)的特異性。在引物設(shè)計(jì)時(shí)如果某位點(diǎn)因?yàn)檫z傳元件的定位而受限,如site-directed 突變、表達(dá)克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構(gòu)建和操作等情況,熱啟動(dòng)PCR 尤為有效。

通化市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用

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傳染病流行過(guò)程的三:個(gè)基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來(lái)源,就是被感染的動(dòng)物,包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動(dòng)物,如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動(dòng)物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動(dòng)物。就是對(duì)某種傳染病的病原體有易感性的動(dòng)物。